Der Vortrag „Grundlagen der Molekularbiologie (2)“ von Dr. rer. nat. Peter Engel ist Bestandteil des Kurses „Biochemie für Mediziner*innen (Dr. Engel)“. Der Vortrag ist dabei in folgende Kapitel unterteilt:
Aus energetischer Sicht werden beim Einbau eines Ribonukleotids bei der RNA-Synthese zwei Anhydridbindungen gespalten.
Die RNA-Synthese erfolgt in der 3’-5’-Richtung.
Der Plus-Strang dient als Matrizenstrang für die Synthese der RNA.
Die Promotor-Regionen liegen unmittelbar vor dem Startpunkt der Transkription.
Prokaryontische Gene sind häufig in Form eines Operons organisiert.
Im Unterschied zu Prokaryonten bilden Eukaryonten in den meisten Fällen polycistronische mRNAs.
Die Operatorsequenz dient im Lac-Operon der Bindung des Repressor-Proteins.
Bei Glucose Mangel steigt in der Bakterienzelle der cAMP Spiegel wodurch das CAP (catobolite activated protein) akvtiviert wird.
Allolactose ist der natürliche Induktor, Isopropylthiogalactosid (IPTG) ist ein synthetischer Induktor des Lac-Operons.
Polycistronische mRNAs besitzen mehrere Ribosomenbindungsstellen und dementsprechend mehrere Startcodons.
Bei Eukaryonten erfolgt die Bildung der reifen mRNA vollständig im Nukleus.
Die RNA Polymerase II ist für die Bildung der hnRNA verantwortlich.
Das α-Aminitin unterbindet sehr effektiv die Bildung der 45 S rRNA.
Enhancer sind regulatorische Sequenzen auf der DNA die in einem definierten Abstand zum Startpunkt der Transkription lokalisiert sind.
Im Unterschied zu den Promotoren sind die Enhancer nicht unmittelbar vor der transkribierten Region lokalisiert.
Das CREB-Protein gehört zu den Transkriptionsfaktoren mit Leucin-reichen Regionen.
Die Steroidhormonrezeptoren gehören zu den Zinkfinger-Proteinen.
Steroidhormonrezeptoren binden als Dimere an palindrome Sequenzen der DNA innerhalb regulatorischen Bereichen eines Genes.
Die Poly-A-Polymerase enthält eine poly-U-RNA, welche als Matrize für die Synthese des Poly-A-Endes dient.
Die Polyadenylierung erfolgt am 5’Ende.
Das Herausschneiden der Introns setzt sich aus einer Abfolge von Umesterungsreaktionen zusammen.
Die 45 S rRNA geht durch Spleißen in die 18 S, 5,8 S und die 28 S rRNA über.
Die Synthese des Apo B48 geht auf alternative Spleißvorgänge zurück.
Die reverse Transkriptase ist eine RNA-abhängige DNA-Polymerase.
Die reverse Transkriptase kann zur Herstellung von intronfreier, eukaryontischer DNA = cDNA benutzt werden.
Durch Klonieren der aus einem bestimmten Zelltyp gewonnenen cDNAs in bestimmte Vektorsysteme, erhält man eine cDNA-Genbibliothe.
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... die Synthese der RNA erfolgt durch RNA-Polymerasen ...
... der sigma-Faktor ist für den Start, der rho-Faktor für die Termination verantwortlich •Promotoren umfassen eine Länge von ca. 40 Basen ...
... Hemmstoff der bakteriellen RNA-Polymerase: Rifampicin •Ablauf und Regulation –oft sind die Gene, die für verschiedene Proteine kodieren, als Gruppe hinter einer gemeinsamen Promotor-Operator- Sequenz angeordnet ...
... der Operator entspricht der Bindungsstelle des Repressors •Repressor –das Operon ist geschlossen, wenn der Repressor an den Operator gebunden ist = keine Transkription ...
... bei Glucosemangel steigt die cAMP Menge und bindet an das CAP (catabolit activated protein) •in Anwesenheit von Lactose werden auch geringe Mengen an Allolactose gebildet ...
... Transkription und Translation laufen nahezu parallel ab ...
... das Primärtranskript unterliegt meist komplizierten Reifungsprozessen (posttranskriptionales Processing) ...
... besitzt eine besondere C-terminale Domäne (CTD) •die Transkription wird nur im dephosphorylierten Zustand gestartet ...
... Eukaryontische Transkriptionsfaktoren der RNAPII ...
... Intron-Exon-Grenzen ...
... Biochemie Aufbau einer eukaryontischen mRNA mG- Cap Schutz vor Abbau Transport aus dem Kern ...
... Spleißen größerer Vorläufermoleküle ...
... Reaktionszyklus der retroviralen Reversen ...